新型溶纤维蛋白酶、其制备方法及用途

摘要

本发明涉及一种新型溶纤维蛋白酶(亦称溶血纤维蛋白酶)及其制备方法与用途。本溶纤维蛋白酶经实验证明具有分解纤维蛋白(fibrin)及纤维蛋白原(fibrinogen)的能力，但不会活化溶血纤维蛋白酶原(plasminogen)。由于本新型酶不具备活化溶血纤维蛋白酶原的能力，使本发明的物质在应用时(如中风后处理)可避免发生不可预测的出血现象。

主权项

一种由裂褶菌分离而得的溶纤维蛋白酶，其特征为：(a)N末端序列为：ASYNGXSS；其中，A代表丙氨酸残基，S代表丝氨酸残基，Y代表酪氨酸残基，N代表天冬酰胺残基，G代表甘氨酸残基及X代表未测出；(b)如图4A所示的LC/MSMS图谱；及(c)分子量为20‑23kD，其中，所述的溶纤维蛋白酶利用下述方法制备，包括：(a)将可产生溶纤维蛋白酶的裂褶菌进行液体培养；(b)将步骤(a)得到的培养液中的裂褶菌菌丝体滤除；(c)将步骤(b)得到的培养液以尺寸排阻型分离膜划分，得到第一滤液及第二滤液，其中第一滤液包含可通过分离膜的相对较小的分子，而第二滤液包含不可通过分离膜的相对较大的分子；(d)使步骤(c)得到的第一滤液中的蛋白质沉淀，得到粗蛋白质；及(e)将步骤(d)得到的粗蛋白质纯化，得到溶纤维蛋白酶。