贝肉中16种脂溶性贝类毒素的液质联用检测方法

摘要

一种贝肉中16种脂溶性贝类毒素的液质联用检测方法，包括样品处理、净化、测定条件、定性测定和定量测定。本发明检测方法采用甲醇提取，固相萃取柱净化，进行贝肉中16种脂溶性贝类毒素的同时检测。方法操作简单方便，净化效果好，整体回收率高，重现性强，同时节省了有机溶剂和处理时间，简化了样品的前处理过程。

主权项

1.一种贝肉中16种脂溶性贝类毒素的液质联用检测方法，包括样品处理、净化、测定条件、定性测定和定量测定，其特征在于具体步骤如下：(1)样品处理：精确称取样品后，加入甲醇，涡旋混合，超声提取，离心取上清液，残渣中加入甲醇，重复提取一次，合并两次提取液，于40℃氮气吹至约1mL，加入3mL水涡旋混匀，超声1min；(2)净化：依次用1mL甲醇、1mL 30％甲醇水溶液活化Strata^TM-X固相萃取柱，注入提取液，再用1mL 20％甲醇水溶液淋洗，最后用1mL 0.3％氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，甲醇定容至1mL，洗脱液过0.22μm滤膜后，供液相色谱-串联质谱分析；(3)测定条件：待测样品用液相色谱-串联四极杆质谱进行测定，仪器参数条件见表1，选择反应监测母离子、子离子和碰撞能量见表2；表1液相色谱-串联四极杆质谱的仪器参数条件表2选择反应监测母离子、子离子、碰撞能量和扫描方式(4)定性测定在同样测试条件下，试样溶液中脂溶性贝类毒素的保留时间与标准物质保留时间相对偏差在±5％以内，且检测到的定性离子的相对丰度，应与浓度相当的标准溶液中定性离子的相对丰度一致；基峰与次强碎片离子丰度比应符合表3要求；表3基峰与次强碎片离子丰度比要求  次强碎片离子相对丰度％  ＞50  ＞20～50  ＞10～20  ≤10  允许相对偏差％  ±20  ±25  ±30  ±50(5)定量测定将混合标准工作液和试样溶液等体积进样测定，按外标法使用标准工作曲线对样品进行定量，试样溶液和标准溶液中脂溶性贝类毒素的响应值均应在仪器检测的线性范围内；试样中脂溶性贝类毒素各组分含量按如下计算，计算结果需扣除空白值，结果保留三位有效数字；式中：X-试样中脂溶性贝类毒素各组分含量，单位为微克每千克；c-试样溶液中脂溶性贝类毒素各组分的浓度，单位为纳克每毫升；V-试样溶液最终体积，单位为毫升；m-试样质量，单位为克。