一种海葵溶细胞素蛋白的重组表达

摘要

本发明涉及海洋生物技术领域，具体涉及一种海葵溶细胞素蛋白的重组表达方法。海葵溶细胞素被命名为actinoporins，是一类分子量20kDa左右的蛋白质，具有十分广泛的生理活性。目前对海葵触手蛋白的分离纯化是获取海葵毒素蛋白的主要方法。本发明提供了一种海葵溶细胞素蛋白的重组表达方法，本发明通过重组表达方法获得的海葵溶细胞素蛋白具有生物活性且纯度高，本发明还提供了该海葵溶细胞素蛋白在制备预防或治疗肿瘤药物中的应用。

主权项

一种海葵溶细胞素蛋白的重组表达方法，该方法包括以下步骤：A、重组海葵溶细胞素表达质粒的构建：设计并合成一对引物如下：上游引物如SEQ ID NO:3所示，下游引物如SEQ ID NO:4所示，PCR扩增，PCR产物如SEQ ID NO:1所示，将目的基因克隆到原核表达载体pET‑22b上，构建成表达质粒pET‑22b‑gigtIV；B、重组海葵溶细胞素rGT‑4蛋白的表达：将pET‑22b‑gigtIV转化大肠杆菌BL21，表达海葵细胞毒素rGT‑4蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。