主权项 |
一种提高色木槭茎芽增殖系数的培养方法,其特征在于提高色木槭茎芽增殖系数的培养方法按以下步骤实现:一、取色木槭成年母树上的休眠枝条用洗衣粉水刷洗,然后用水冲洗干净,剪成2~3cm的茎段,并且每段具有1~2个腋芽或1个顶芽,再将茎段在洗衣粉水中浸泡10min,其间不停搅拌,然后在流水下冲洗40min;二、茎段洗净后于超净工作台上用质量浓度为75%的乙醇溶液浸泡30s,然后在加有2~3滴Twen‑20的质量浓度为2%的NaClO中消毒20min,再用无菌水冲洗3~5次;三、经步骤二消毒后的茎段用无菌的滤纸吸干表面的水分,然后用镊子将芽鳞剥除,直至仅剩1~2mm芽点,再将茎段两端用手术刀各切除0.5cm,按照形态学上端向上的方向将茎段垂直插入到装有MS基本培养基的培养瓶中,插入深度为0.5cm,然后将培养瓶用塑料封口膜封口后放于培养室中,在温度为25℃、光照强度为40μmol.m‑2s‑1、光/暗周期为16/8h的条件下培养2周获得带芽的茎段;四、取步骤三所得带芽的茎段接种到装有20ml嫩茎伸长培养基的50ml培养瓶中,然后放于培养室,在温度为25℃、光照强度为40μmol.m‑2s‑1、光/暗周期为16/8h的条件下培养21d获得伸长的嫩茎;五、取步骤四所得伸长的嫩茎接种到装有20ml嫩茎增殖培养基的50ml培养瓶中,然后放于培养室,在温度为25℃、光照强度为40μmol.m‑2s‑1、光/暗周期为16/8h的条件下培养21d获得小植株,即完成提高色木槭茎芽增殖系数的培养;其中步骤四中嫩茎伸长培养基是以MS基本培养基为基本培养基,且每1L嫩茎伸长培养基中还包含0.1mg的奈乙酸、20g的蔗糖和6g的琼脂,pH值为5.8;步骤五中嫩茎增殖培养基是以MS基本培养基为基本培养基,且每1L嫩茎增殖培养基中还包含0.1mg的吲哚丁酸和1mg的6‑苄氨基腺嘌呤。 |