主权项 |
一种草莓种苗的组织培养方法,其特征在于,其步骤如下:(1)消毒:选取春季的母草莓苗发生的匍匐茎作外植体,用水冲洗后,然后用70%酒精浸泡消毒11‑13秒后,无菌水清洗,接着用0.1%HgCl2消毒13‑18分钟后,再用无菌水清洗;(2)初代培养:在提视显微镜下切取0.3mm的消毒处理后的母草莓苗茎尖接入培养基中进行初代培养55‑60天;初代培养的温度为23‑25℃,培养时先在黑暗中放置培养5‑8天后,再按12‑14小时/天的光照进行培养,培养时每2天用75%酒精对环境进行消毒一次,每周紫外线对环境进行消毒1次;(3)增殖、生根培养:将初代培养的草莓苗进行增殖培养,增殖培养的周期为30天,增殖培养2个周期后,分割成单株,再移入培养基中进行发根培养20天;(4)驯化培养:将生根培养的草莓苗移入草炭与珍珠岩混合而成的驯化基质中进行驯化培养7天即得草莓种苗,培养时保持空气的相对湿度为90%,温度为15‑20℃,遮光率为75%;所述的培养基的组成为:NH4NO3 82.5g;KNO3 95g;KH2PO4 8.5g;H3BO3 310mg;MnSO4·4H2O 18.95mg;ZnSO4·7H2O 53mg;KI 41.5mg;Na2MoO4·2H2O 12.5mg;CuSO4·5H2O 1.25mg;CoCl2·6H2O 1.25mg;CaCl2·2H2O 22g;MgSO4·7H2O 18. 5g;FeSO4·7H2O 1.865g;Na2‑EDTA 1.39g;肌醇 10g;烟酸 50mg;吡哆醇 50mg;硫胺酸 10mg;甘氨酸 200mg;将上述各组分混合后,加入纯净水至1L,用1mol/LNaOH调pH值至5.8‑5.9后,再加入蔗糖30g、琼脂8g后加热至沸腾;分装于培养瓶后加热至121℃并维持20分钟进行消毒,自然冷却,即得培养基。 |