稻黑孢菌46代谢产物在防治番茄灰霉病菌中的应用

摘要

本发明涉及微生物技术领域，本发明所述的夹竹桃内生真菌是从浙江省农业科学院内采集的夹竹桃活体中采用内生真菌分离技术分离获得的，经微生物分类学鉴定，命名为稻黑孢菌(Nigrospora oryzae)46，该菌株已在微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4509。本发明最显著的特征是该菌株液体发酵能产生对黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、菜豆炭疽病菌(Colletotrichumlindemuthianum)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等有抑制作用的活性代谢产物，是农业上重要的微生物资源。

主权项

稻黑孢菌(Nigrospora oryzae)46代谢产物防治番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的应用，所述的稻黑孢菌46已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2010年12月31日，保藏登记号CGMCC No.4509，所述代谢产物按以下方法制备：(1)菌种的活化培养：将分离保存的稻黑孢菌46菌种移至马铃薯葡萄糖PDA固体平板上，在28℃±1℃条件下培养，至菌丝覆盖整个培养皿，用直径为4mm打孔器打孔获得菌饼，供接种用；(2)发酵培养：发酵培养液为每1000mL中含有黄豆饼粉20g，玉米粉15g，可溶性淀粉20g，麸皮10g，蛋白胨8g，NH4NO33g，(NH4)2SO45g，CaCO35g，MgSO41g，每300mL三角瓶装发酵培养液60mL；配制后121℃灭菌20min，待冷却至40℃在无菌条件下挑取1直径为4mm菌饼，在28℃±1℃条件下，摇床转速180转/分钟，发酵培养128h；(3)发酵物提取：发酵完毕后离心收集发酵液，加入等体积乙酸乙酯萃取，取下层，再用等体积正丁醇萃取，取上层，在真空条件下浓缩至浸膏，得正丁醇萃取物。