刀鲚性别特异SRAP标记带的筛选方法及性别鉴定方法

摘要

本发明公布了一种刀鲚性别特异SRAP标记带的筛选方法及性别鉴定方法，通过49对引物对的SRAP-PCR反应，筛选刀鲚性别特异SRAP标记带，然后用特异引物对扩增性别未知刀鲚的DNA样品，通过能否扩增出相应特异条带来鉴别刀鲚的性别。本发明克服了刀鲚现有性别鉴定技术的局限和不足，提供了一种准确、便捷的性别鉴定方法。

主权项

一种刀鲚性别特异SRAP标记带的筛选方法，其特征在于包括以下步骤：（1）采集刀鲚样本，解剖鱼体进行性别鉴定，分别提取雌、雄样本总DNA；（2）设计SRAP引物序列（见表1）14条共49对，分别进行SRAP‑PCR扩增，筛选出雌、雄性别特异标记带SRAP1和SRAP2，正向引物（5′—3′）：     me1    TGAGTCCAAACCGGATAme2    TGAGTCCAAACCGGAGCme3    TGAGTCCAAACCGGAATme4    TGAGTCCAAACCGGACCme5    TGAGTCCAAACCGGAAGme6    TGAGTCCAAACCGGTAAme7    TGAGTCCAAACCGGTCC反向引物(5′—3′)：em1    GACTGCGTACGAATTAATem2    GACTGCGTACGAATTTGCem3    GACTGCGTACGAATTGACem4    GACTGCGTACGAATTTGAem5    GACTGCGTACGAATTAACem6    GACTGCGTACGAATTGCAem7    GACTGCGTACGAATTCAA；（3）回收性别特异标记带SRAP1、SRAP2，测序。