一种人胰岛来源的胰腺干细胞系的构建及向胰岛素分泌细胞分化的方法

摘要

本发明公开了一种人胰岛来源的胰腺干细胞系的构建与分化的方法，所述的胰腺干细胞系，是从人胰岛细胞团内扩增出胰腺干细胞，且具有多向分化潜能。其经过诱导后能够分化形成类神经细胞、类脂肪细胞、类骨细胞、以及功能性胰岛样细胞团。将功能性胰岛样细胞团移植到患有糖尿病裸鼠模型的体内，能降低模型裸鼠血糖浓度，在24天内能够维持正常的血糖水平。

主权项

一种人胰岛来源的胰腺干细胞系的构建方法，该方法包括以下步骤：1)将人胰腺细胞加入培养液A中培养2‑3天；2)挑出上述培养物中的胰岛细胞团，用蛋白酶消化成单细胞，接种于培养液A中培养；3)待细胞生长至80‑90％融合时，传代，加入培养液B培养，得到胰岛细胞来源的人胰腺干细胞系(hPSC)；其中所述培养液A为含有10‑25％ FBS、8‑12mM尼克酰胺、18‑22ng/mLEGF和18‑22ng/mL bFGF的RPMI1640；所述培养液B为含有10‑25％FBS、18‑22ng/mLbFGF的Low‑DMEM。