抗阪歧肠杆菌特异性免疫奶制品及其制备方法

摘要

本发明涉及一种抗阪歧肠杆菌特异性免疫奶制品及其制备方法，该奶制品中含有阪歧肠杆菌特异性IgY抗体，其制备方法是，先培养单一阪歧肠杆菌或多种致病菌/病毒，再制备单一或复合抗原；然后采用所制成的抗原对产蛋禽类进行高免疫注射，检取免疫禽类所产的免疫蛋，制备抗阪歧肠杆菌特异性IgY或抗阪歧肠杆菌特异性复合IgY；再经纯化、过滤处理，即得抗阪歧肠杆菌特异性IgY或复合IgY成品；取该抗阪歧肠杆菌特异性IgY或复合IgY与适当比例的奶粉原料进行混合，即可制成抗阪歧肠杆菌的免疫奶制品。本发明提供的抗阪歧肠杆菌特异性免疫奶制品及其制备方法，有效解决了困扰全球奶业的婴儿奶粉受阪歧肠杆菌、沙门氏菌等污染的难题。

主权项

一种抗阪歧肠杆菌免疫奶制品的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：1)对普通奶制品中检测到的残留细菌以及从受感染人体内获取的病原体进行分析，筛选并确定NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌作为单一免疫抗原，或将筛选出的NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌和沙门氏菌、大肠杆菌和婴幼儿轮状病毒一起作为复合免疫抗原；2)培养上述筛选出的NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌，或同时培养NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌和婴幼儿轮状病毒；3)利用上述培养出的NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌制备单一抗原，或者采用NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌和沙门氏菌、大肠杆菌以及婴幼儿轮状病毒，制备含NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌的复合抗原；4)利用所述NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌单一抗原或含NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌的复合抗原，对产蛋禽类进行高免疫注射，并检取免疫禽类所产的免疫蛋；5)取所述免疫蛋的蛋黄，制备相应的抗阪歧肠杆菌特异性IgY抗体粗提物或复合IgY抗体粗提物；6)对所述抗阪歧肠杆菌特异性IgY抗体或复合IgY抗体粗提物进行纯化，并进行过滤处理以滤除各种细菌和病毒，得到相应的抗阪歧肠杆菌特异性IgY抗体或复合IgY抗体成品；7)取所述抗阪歧肠杆菌特异性IgY抗体或复合IgY抗体成品按0.01‑1‰的比例与液态奶或奶粉原料混合，制成相应的抗阪歧肠杆菌免疫奶制品；其中在所述步骤(3)中制备单一阪歧肠杆菌抗原的方法为：取事先培养好的NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌2×109/mL，然后置入超声粉碎机中加以超声 粉碎，再将经粉碎处理后的菌体混合液按10～1：1～10比例加入福氏佐剂，即制得含阪歧肠杆菌菌体的单一抗原；在所述步骤(3)中制备含NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌的复合抗原的方法为：取事先培养好的NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌2×109/mL、大肠杆菌2×109/mL和沙门氏菌2×109/mL按1～10∶10～1∶10～1的比例混合，然后置入超声粉碎机中进行超声粉碎，再取这三种菌体之混合物与事先培养好并纯化的轮状病毒液按10～1∶1～10的比例混合制得抗原混合液，将该混和液充分混和均匀，然后按10～1∶1～10的比例加入福氏佐剂，再置入高速匀浆机中，以8,000‑30,000rpm高速匀化，形成油包水乳液，即制得含NO.BAA‑894型阪歧肠杆菌的复合抗原；所述抗阪歧肠杆菌特异性IgY抗体或复合IgY抗体成品对抗NO.BAA‑894型、NO.29004型、NO.29544型和NO.51329型阪歧肠杆菌。