血液细菌内毒素检测试剂盒的制备和应用

摘要

本发明提供一种特异性鲎试剂及其制备方法，其制备步骤包括采血、分离细胞、裂解细胞、分离细胞壁、加促活剂和G因子抑制剂配制半成品等步骤；本发明还提供一种包括上述的特异性鲎试剂的血液细菌内毒素检测试剂盒，其还包括体液处理剂I号、体液处理剂Ⅱ号、细菌内毒素质控品和检查用水。本发明提供的特异性鲎试剂及检测试剂盒，可以定性鉴别鲎试剂与细菌内毒素和葡聚糖类物质的凝胶反应，从而提高血液细菌内毒素检测结果的可靠性，实现对血液细菌内毒素的定量检测；采用它们进行血液细菌内毒素的检测具有灵敏度高、检测结果可靠和检测效率高的特点。

主权项

一种特异性鲎试剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A.采血，加入与鲎血的体积比为1:6～1:10的抗凝剂；B.分离细胞：将鲎血移至离心瓶内，在750‑850转/分的速度下离心分离，弃血清；C.裂解细胞：将步骤B余下的鲎血细胞移至收集瓶内，按鲎血细胞体积的40%‑50%的量加入细胞裂解液，裂解细胞得鲎血细胞溶解物；D.分离细胞壁：按照与鲎血细胞溶解物的体积比为1:0.8～1:1.2的量向鲎血细胞溶解物中加入氯仿，并加入适量聚乙二醇8000，随即混合形成混合溶液，然后离心，分离提取物，制得鲎试剂原液。E.加入促活剂及G因子抑制剂，配制半成品：按鲎试剂原液体积与促活剂体积比为1:0.15～1:0.30的比例加入预先调配好的促活剂，按照鲎试剂原液体积与G因子抑制剂体积比为1:0.25～1:0.50的比例加入G因子抑制剂，搅匀，制成鲎试剂半成品。F.灌装、冷冻干燥和封口，制得特异性鲎试剂成品。