硝基呋喃类药物代谢物残留的酶联免疫检测试剂盒及使用方法

摘要

本发明公开了一种检测硝基呋喃类药物代谢物残留的酶联免疫试剂盒，包括：包被多种硝基呋喃代谢物抗原的酶标板、酶标记抗体工作液、标准溶液、底物液、底物缓冲液、反应终止液、浓缩洗涤液和样品稀释浓缩液。本发明同时公开了所述试剂盒进行检测的使用方法，包括样品的前处理，使用试剂盒检测和结果处理与分析等步骤。本发明提供的试剂盒采用直接竞争酶联免疫吸附分析技术，既可同时检测多种硝基呋喃代谢物总残留，又可检测单一硝基呋喃代谢物残留，避免了同一样品需多次检测，降低了漏检率，灵敏度高、稳定性好、步骤少、成本低，非常适合大量样品的筛查，具有重要的现实意义。

主权项

一种硝基呋喃类药物代谢物残留的酶联免疫初筛检测试剂盒，其特征在于包含下列成分：（1）包被了多种硝基呋喃代谢物偶联抗原的酶标板；（2）酶标记抗体工作液；（3）硝基呋喃代谢物标准溶液；（4）底物液；（5）底物缓冲液；（6）反应终止液；（7）浓缩洗涤液；（8）样品稀释浓缩液；其中，所述酶标板采用96孔或40孔酶标板，包被有能与硝基呋喃代谢物抗体特异结合的硝基呋喃代谢物偶联抗原，并封闭微孔表面未吸附硝基呋喃代谢物偶联抗原的位点；所述多种硝基呋喃代谢物为3‑氨基‑2‑恶唑烷酮、3‑氨基‑5‑吗琳代甲基‑2‑恶唑烷酮、氨基脲和1‑氨基‑乙内酰脲；所述酶标记硝基呋喃代谢物抗体工作液为采用戊二醛法或过碘酸盐氧化法将标记酶与代谢物抗体进行分别偶联后按一定比例混合得到；所述标记酶为辣根过氧化物酶或细菌提取的碱性磷酸酯酶；所述硝基呋喃代谢物抗体为鼠单克隆抗体、兔多克隆抗体或基因工程抗体任意一种；当标记酶为辣根过氧化物酶时，所述底物液为含有3,3,5,5‑四 甲基联苯胺或邻苯二胺的pH5.0磷酸‑柠檬酸缓冲溶液，所述底物缓冲液为含有过氧化氢或过氧化脲的pH5.0磷酸‑柠檬酸缓冲溶液，所述终止液为1～2mol/L硫酸溶液或2mol/L的氢氧化钠溶液；当标记酶为细菌提取的碱性磷酸酯酶时，所述底物液为对硝基磷酸盐缓冲液，所述底物缓冲液为含有过氧化氢或过氧化脲的pH5.0磷酸‑柠檬酸缓冲溶液，所述终止液为1～2mol/L硫酸溶液或2mol/L的氢氧化钠溶液。