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基于机器码识别技术的血液病原菌标准菌株的编码方法，其特征在于：包括如下步骤：a.针对七种病原菌16SrDNA和23SrDNA的保守区域设计通用引物并荧光标记；所述七种病原菌为：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌和肺炎链球菌；所述通用引物序列为：上游引物：5’‑TTGTAAATACCGCCCGTCA‑3’，下游引物：5’‑GGTTGCTTAGATGGTTCAGTTC‑3’；b.对内参照体系进行CE‑SSCP分析，得内参照的CE‑SSCP电泳图；所述内参照体系由9μl去离子甲酰胺、0.5μl浓度为3M的NaOH和0.5μl ROX 500混合而得；所得内参照的CE‑SSCP电泳图中，每两相邻峰之间的区域分别记为一个区间；CE‑SSCP分析所用筛分介质为POP‑7胶，CE‑SSCP分析过程中的电泳参数为：进样电压15.0KV，电泳电压13.0KV，电泳温度35℃；c.分别提取所述七种病原菌标准菌株的基因组DNA，以该基因组DNA为模板，采用步骤a所得通用引物进行PCR扩增，所得扩增产物转移至步骤b所述的内参照体系中进行CE‑SSCP分析，得七种病原菌标准菌株的CE‑SSCP电泳图；分别将七种病原菌标准菌株的CE‑SSCP电泳图与内参照的CE‑SSCP电泳图进行比对并按照二进制编码方法进行编码，出现病原菌峰的区间记为1，未出现病原菌峰的区间记为0，然后将二进制编码转化为十进制编码，即得七种病原菌标准菌株CE‑SSCP电泳图的十进制编码结果；所述PCR扩增的循环 参数为：94℃预变性5min；94℃变性40s，54℃退火45s，72℃延伸40s，共30个循环；72℃终延伸5min，结束PCR扩增。 |
