用于检测物质致敏性和药物筛选的人工表皮体外模型

摘要

本发明提供了一种用于检测物质致敏性以及用于皮肤外用免疫调节药物的筛选或药效学评价的人工表皮体外模型，所说的模型是由人工表皮与单核细胞系细胞共培养而得。本发明的人工表皮体外模型具有如下技术效果：1、通过检测模型中相关细胞因子及细胞表面标记物的变化，可评价各种化合物、皮肤外用制剂及化妆品的致敏性；在判断物质致敏性时，具有很高的敏感度、特异性和准确性，检测方法简单，应用范围广；2、可以用于皮肤外用免疫调节药物的筛选或药效学评价；3、模型构建成本低，批间差异小，质量容易控制；4、模型所用的材料易得，便于规模化生产。

主权项

一种用于检测物质致敏性和药物筛选的人工表皮体外模型的构建方法，其特征在于，所说的体外模型的构建方法包括如下步骤：1)取人角质形成细胞悬液，接种到插入式培养皿的上室内，接种前预先在插入式培养皿的下室内种满人成纤维细胞，接种后在37℃、含5％CO2的培养箱中培养1‑5天，待细胞生长至汇合状态后，转至气液界面培养10‑20天，得到人工表皮；2)将单核细胞系细胞以(2‑8)×105个/ml的密度接种于孔板内，将步骤1)中得到的人工表皮连同插入式培养皿的上室一起转移至培养有单核细胞系细胞的孔内，共培养12‑48小时至稳定状态，得到含有人工表皮和单核细胞系细胞的体外模型，其中所说的单核细胞系细胞选自THP‑1、MUTZ‑3、KG‑1或U937细胞系。