南美白对虾传染性肌肉坏死病的检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种南美白对虾传染性肌肉坏死病的检测方法及试剂盒。本发明以南美白对虾肌肉组织的cDNA为模板，在荧光PCR反应体系中加入引物和探针，进行实时荧光定量PCR，能够有效检测南美白对虾是否被传染性肌肉坏死病毒感染；引物对为5′-GGGAGTAGATATAAATGTTCAG-3′和5′-CAACCACCCAAATTCATA-3′；探针为5′-FAM-CACCTGCTACCACTTCTTCTCTT-TAMRA-3′。实现该方法的试剂盒主要包含该引物对和探针。本发明提供的方法和试剂盒准确、快速，其检测结果与其他检测技术相比，特异性好，检测灵敏度高，具有更大的可靠性和适应性，提高了检测效率，从而为南美白对虾传染性肌肉坏死病毒提供更有为效的检测手段。

主权项

一种南美白对虾传染性肌肉坏死病的检测方法，其特征在于包含以下步骤：(1)设计实时荧光定量PCR所需要的引物和探针如下所示，方向5’→3’：正向引物CPI‑603：GGGAGTAGATATAAATGTTCAG；反向引物CPI‑732：CAACCACCCAAATTCATA；探针PCPI‑712：FAM‑CACCTGCTACCACTTCTTCTCTT‑TAMRA；(2)检测：以南美白对虾肌肉组织为材料提取RNA，逆转录，得到cDNA；以cDNA为模板，在荧光PCR反应体系中加入步骤(1)设计的引物和探针，设定实时荧光PCR仪反应程序，进行实时荧光PCR，从而检测出所检测的南美白对虾是否为传染性肌肉坏死病毒阳性。