发明名称 一种利用二乙氨乙基葡聚糖提高基因转染猪皮转染效率的方法
摘要 本发明涉及一种利用二乙氨乙基葡聚糖提高基因转染猪皮转染效率的方法,包括如下步骤:1)制备待转染的猪皮肤;2)使用浓度为500-5000μg/ml二乙氨乙基葡聚糖对108PFU/ml Ad5重组腺病毒载体进行震荡混合,孵育后制备成转染液;3)将步骤2)制备的转染液对步骤1)制备的猪皮肤进行转染。本发明中二乙氨乙基葡聚与Ad5重组腺病毒载体混合后转染猪皮肤细胞时,其携带的阳离子可中和腺病毒载体和细胞表面的阴离子,降低了腺病毒载体和细胞表面之间的静电排斥力,从而增加腺病毒载体与猪皮肤细胞的相互接触,提高腺病毒载体对猪皮肤的转染效率。
申请公布号 CN101613709B 申请公布日期 2013.01.23
申请号 CN200810126822.9 申请日期 2008.06.24
申请人 重庆宗申军辉生物技术有限公司 发明人 魏泓;葛良鹏;刘志;吴军
分类号 C12N15/67(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;A61F2/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/67(2006.01)I
代理机构 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人 张建山;逯长明
主权项 一种利用二乙氨乙基葡聚糖提高基因转染猪皮转染效率的方法,其特征在于包括如下步骤:1)制备待转染的猪皮肤;2)使用浓度为500‑5000μg/ml二乙氨乙基葡聚糖对108PFU/ml含有CTLA4Ig重组基因的Ad5重组腺病毒载体进行震荡混合,孵育后制备成转染液;3)将步骤2)制备的转染液对步骤1)制备的猪皮肤在CO2培养箱内37℃转染1‑3小时。
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