一种链霉菌抗菌产物的提取方法

摘要

本发明涉及一种链霉菌抗菌产物的提取方法，属于生物技术领域。链霉菌(Streptomyces.sp)S24经活化、发酵，发酵液经灭菌、离心、大孔吸附树脂AB-8吸附、75～85％丙酮解吸、解吸液回收溶剂蒸发、干燥，获得抗菌产物提取物。试验证明，该抗菌产物对粮食和饲料中的主要霉变真菌如黄曲霉、黑曲霉、赭曲霉、烟曲霉以及人体致病真菌黄曲霉、烟曲霉等具有广谱的抗菌活性。由于本发明提供的抗菌产物对多种引起粮食和饲料霉变真菌及人体致病真菌具有明显抑制作用，表现出高效广谱特性，并且抗菌产物的提取方法简便，成本低，在食品防腐剂、饲料添加剂及医药方面有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。

主权项

一种链霉菌抗菌产物的提取方法，其特征在于包括以下步骤：a、将斜面保存的菌种转接至平板PDA培养基，28℃恒温培养48～72小时；PDA培养基为：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15g，(NH4)2SO4 1g，MgSO4 1g，KH2PO4 0.6g，CaCO3 3g，水1000ml；b、将PDA平板活化菌种转接至种子培养基，摇床发酵24小时，按2％接种量转接至发酵培养基摇床发酵84‑96小时，收集发酵液，低速大容量离心机4200转/分，离心30分钟，收集发酵上清液；种子及发酵培养条件为：温度28℃，摇床转速200转/分，摇瓶装液量为50ml/250ml(或100ml/500ml)；种子及发酵培养基配方为复合培养基，具体为：葡萄糖16g，可溶性淀粉2.5g，蛋白胨10g，豆饼粉26g，NaCl 7.5g，(NH4)2SO44g，水1000ml；c、将大孔吸附树脂AB‑8与发酵上清液按比例1∶20M∶V混合，150转/分，振荡吸附3‑4小时；d、将吸附后的树脂收集装柱，用浓度为15％‑25％的乙醇洗脱后去除部分杂质，然后用浓度为75％‑85％的丙酮洗脱抗菌产物，流速为1.0ml/min，从色素带流出开始收集洗脱液，收集1.2‑1.5倍柱体积后停止收集；e、蒸发浓缩干燥丙酮洗脱液，所得到的干物即为抗菌产物。