齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法

摘要

本发明公开了一种齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，涉及生物工程技术领域。本发明通过下述技术方案予以实现：以齿瓣石斛优质单株为材料，以茎段作为外植体，经消毒处理后进行诱导培养、增殖培养、生根培养，各培养阶段温度控制在25±2℃，光照强度1500～2000lx，光照12小时/天，环境噪声小于40分贝。该方法不仅使种苗保持母株的优良性状，而且还提高了种苗繁殖系数，为齿瓣石斛工厂化生产奠定基础。

主权项

一种齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，外植体消毒：选取茎段，用75％酒精表面灭菌30～60秒，再将其置于0.1％升汞溶液中消毒10～20分钟，然后用无菌水冲洗5～6次；诱导培养：将茎段接种在诱导培养基上，诱导培养基为MS+6‑BA 2～4毫克/升+NAA0.01～0.05毫克/升+椰子汁10～50毫升/升+抗坏血酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁20～50克/升+蔗糖20～40克/升，培养时间35～40天；增殖培养：将单芽从茎段上切下并转接到增殖培养基中，增殖培养基为MS+6‑BA 2～4毫克/升+NAA0.1～1毫克/升+椰子汁10～50毫升/升+抗坏血酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁100～150克/升+蔗糖20～40克/升，培养时间40～50天；生根培养：将丛生芽接种于生根培养基中，生根培养基为MS+NAA0.1～1毫克/升+IBA0.1～1.0毫克/升+椰子汁10～50毫升/升+抗坏血酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁50～100克/升+香蕉泥50～100克/升+活性炭1克/升+蔗糖20～40克/升，培养时间35～40天。