| 摘要 |
1. Способ детекции с помощью гибридизационной цепной реакции специфических фрагментов ДНК или РНК, отличающийся тем, что в режиме реального времени контролируется не появление ампликонов в виде увеличенного числа копий искомых фрагментов нуклеиновых кислот, а регистрируется протекание в изотермических условиях самой цепной реакции, где в качестве инициатора данного процесса выступают специфичные нуклеотидные последовательности молекул денатурированной ДНК или РНК, путем детекции увеличивающегося свечения реакционного раствора, вызванного флуоресцентным красителем, входящим вместе с универсальным гасителем в состав одной из двух подверженных самосборке шпилечных олигонуклеотидных конструкций, где за счет имеющей место вторичной структуры краситель с гасителем изначально сближены настолько, что резонансная энергия первого поглощается вторым и рассеивается им в виде тепла, а при образовании в ходе гибридизационной цепной реакции наноструктур и по мере роста последних все большее число молекул красителя и гасителя пространственно разделяются, что сопровождается исчезновением эффекта гашения флуоресценции и как следствие увеличением свечения.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что флуоресцентные красители, составляющие пару донор/акцептор, входят в состав разных шпилечных структур, что не позволяет осуществляться переносу флуоресцентной резонансной энергии и только по мере роста олигонуклеотидных конструкций из них происходит сближение данных красителей настолько, что перенос энергии становится возможным и в режиме реального времени может регистрироваться увеличение свечения акцепторного |
