发明名称 |
大规模生产质粒DNA的上游和下游纯化方法 |
摘要 |
公开从生产过程,包括大规模发酵方案中,来分离临床级质粒DNA的方法,所述方法包括了两个可供选择的均为质粒DNA纯化工艺中的核心单元操作。在此公开的新型上游和下游纯化工艺可降低产品成本并提高工艺稳定性。在此公开的纯化工艺中,任何一种或两种全部都可以与另外的本领域已知的与DNA质粒纯化技术相关的纯化步骤结合使用。 |
申请公布号 |
CN101310022B |
申请公布日期 |
2013.01.16 |
申请号 |
CN200680003564.4 |
申请日期 |
2006.01.27 |
申请人 |
默沙东公司 |
发明人 |
D·B·博伊德;A·J·克里斯托佩特;R·J·兰德;J·C·墨菲;M·A·温特斯 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
中国专利代理(香港)有限公司 72001 |
代理人 |
刘健;黄可峻 |
主权项 |
从大规模微生物发酵的细胞溶胞产物中纯化超螺旋质粒DNA的方法,所述方法包括:(a)裂解含超螺旋质粒DNA的微生物宿主细胞,形成宿主细胞溶胞产物;(b)通过用聚乙二醇(PEG)絮凝宿主细胞碎片来澄清所述宿主细胞溶胞产物,其中所述PEG的浓度是使絮凝步骤期间质粒DNA沉淀的可能性最小的浓度;和(c)除去絮凝的宿主细胞碎片,产生含有所述超螺旋质粒DNA的澄清的溶胞产物。 |
地址 |
美国新泽西州 |