一种牛奶中人乳铁蛋白筛查试纸条及制备方法

摘要

本发明属于转基因成分检测技术领域，与免疫胶体金技术有关。公开了一种用于快速检测转人乳铁蛋白(hLF)基因牛奶的免疫胶体金试纸条及其制备方法，本发明的试纸条，包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬，其特征在于，在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的结合垫上包被有所述的抗hLF多克隆抗体-胶体金标记物，该多克隆抗体通过人工合成hLF多肽后免疫家兔而制得。所述的硝酸纤维素膜上分别包被有hLF蛋白构成的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6)。本发明的试纸条特异性强，操作简便，检测快速。

主权项

一种牛奶中人乳铁蛋白免疫胶体金筛查试纸条，其包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬，其特征在于，在PVC背衬(1)上依次搭接粘帖样品垫(3)、结合垫(4)、硝酸纤维素膜(2)及吸水纸(7)；所述的结合垫(4)上包被有兔抗人乳铁蛋白多克隆抗体；所述的硝酸纤维素膜(2)上分别包被有人乳铁蛋白的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6))；所述的兔抗人乳铁蛋白多克隆抗体是通过如下步骤制备得到的：(1)对人乳铁蛋白进行分析，选择亲水性好、处于分子表面、柔韧性好且与牛乳铁蛋白同源性低的区段，人工合成一段抗原多肽，其蛋白质序列如序列表SEQ ID NO：2所示；(2)将步骤(1)所示的多肽交联到载体蛋白匙孔血蓝蛋白上，得到复合蛋白，以该复合蛋白为抗原，通过免疫获得阳性血清，经亲和纯化后制备得到兔抗人乳铁蛋白多克隆抗体。