发明名称 基于基因组简化与二代测序DNA文库构建方法及试剂盒
摘要 一种生物技术领域的基于基因组简化与二代测序DNA文库构建方法及试剂盒,该方法和试剂盒针对现有文库构建方法不足,可用于参考基因组不完善、研究群体系谱不清晰、无单体型图物种的全基因组SNP检测及基因分型。本发明涉及的DNA文库构建方法及试剂盒操作流程简单,产生的文库测序质量较高,个体间片段分布变异性小,研究成本低,在实现高通量全基因组SNP检测及基因分型研究中具有非常广阔的应用前景。
申请公布号 CN102877136A 申请公布日期 2013.01.16
申请号 CN201210358999.8 申请日期 2012.09.24
申请人 上海交通大学 发明人 潘玉春;陈强;杨玉梅;王起山;张向喆;马育芳;陈振亮;廖荣荣;涂盈盈;颉孝贤;王振;贺鹏飞;张哲
分类号 C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C40B50/06(2006.01)I
代理机构 上海交达专利事务所 31201 代理人 王毓理
主权项 一种基于基因组简化与二代测序DNA文库构建方法,其特征在于,包括以下步骤:第一步、基因组DNA的提取:利用组织DNA提取试剂盒提取基因组DNA,利用限制性内切酶对基因组DNA进行消化处理,得到限制性片段;第二步、使用T4DNA连接酶对限制性片段连接上DNA条形码‑接头(DNA Barcode Adapter),得到DNA条形码‑接头的序列对;第三步、将DNA条形码‑接头的序列对进行混合,然后以混合物作为模板进行PCR扩增,扩增后的产物经琼脂糖凝胶电泳后回收DNA片段作为测序文库,采用芯片分析系统进行最终的质量检测和测序。
地址 200240 上海市闵行区东川路800号