稳定的功能嵌合纤维二糖水解酶I类酶

摘要

本发明内容涉及CBH I嵌合体融合的多肽、编码该多肽的核酸以及用于产生该多肽的宿主细胞。

主权项

一种基本上纯化的嵌合多肽，包含来自至少两个不同的亲本纤维二糖水解酶I(CBH I)多肽的至少两个结构域，其中所述结构域从N端到C端包含：(区段1)‑(区段2)‑(区段3)‑(区段4)‑(区段5)‑(区段6)‑(区段7)‑(区段8)；其中：区段1包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ IDNO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基从大约1或从大约18或19到大约x1至少50‑100％相同的序列；区段2包含与SEQID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x1到大约x2至少50‑100％相同的序列；区段3包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x2到大约x3至少50‑100％相同的序列；区段4包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x3到大约x4至少50‑100％相同的序列；区段5包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ IDNO：10(“5”)的氨基酸残基x4到大约x5至少50‑100％相同的序列；区段6包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x5到大约x6至少50‑100％相同的序列；区段7包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x6到大约x7至少50‑100％相同的序列；及区段8包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQID NO：10(“5”)的氨基酸残基x7到大约x8至少50‑100％相同的序列；其中x1是SEQ ID NO：2、4、6或8的残基47、48、49、50、51或52，或是SEQ ID NO：10的残基48、49、50、51、52或53；x2是SEQ ID NO：2或10的残基92、93、94、95、96或97，或是SEQ ID NO：4、6或8的残基91、92、93、94、95或96；x3是SEQ ID NO：2的残基127、128、129、130、131或132，或是SEQ ID NO：4或6的残基125、126、127、128、129 或130，或是SEQ ID NO：8的残基126、127、128、129、130或131，或是SEQ ID NO：10的残基123、124、125、126、127或128；x4是SEQ ID NO：2的残基175、176、177、178、180或181，或是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6的残基173、174、175、176、177或178，或是SEQ ID NO：8的残基174、175、176、177、178或179，或是SEQ ID NO：10的残基171、172、173、174、175或176；x5是SEQ ID NO：2的残基221、222、223、224、225或226，或是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6的残基219、220、221、222、223或224，或是SEQ ID NO：8的残基220、221、222、223、224或225，或是SEQ ID NO：10的残基217、218、219、220、221或222；x6是SEQ ID NO：2的残基268、269、270、271、272或273，或是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6的残基266、267、268、269、270或271，或是SEQ ID NO：8的残基267、268、269、270、271或272，或是SEQ ID NO：10的残基264、265、266、267、268或269；x7是SEQ ID NO：2的残基384、385、386、387、388或389，或是SEQ ID NO：4的残基385、386、387、388、389或390，或是SEQ ID NO：6的残基378、379、380、381、382或383，或是SEQ ID NO：8或10的残基383、384、385、386、387或388；并且x8是对应于SEQ ID NO：2的残基454、SEQ ID NO：4的残基457、SEQ ID NO：6的残基458、SEQ IDNO：8的残基453、SEQ ID NO：10的残基455、或者具有序列SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的多肽的C端的氨基酸残基，其中所述嵌合多肽具有纤维二糖水解酶活性和与包含SEQ ID NO：2、4、6、8或10的CBH I多肽相比改善的热稳定性、pH稳定性和/或表达。