一种mbr-FPGS高效表达载体及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种mbr-FPGS高效表达载体，质粒载体为pEGFP-C1，在pEGFP-C1的CMV启动子上游含有279bp长的mbr序列，在pEGFP-C1的HindⅢ和EcoRⅠ两个酶切位点之间含有FPGS的蛋白质编码区；其中，mbr序列如序列表2所示。所构建的mbr-FPGS高效表达质粒经WesternBlot实验、MTT实验测得IC50结果表明：mbr-FPGS高效表达质粒比FPGS对照质粒提高了FPGS的表达水平30%(p<0.05)，mbr-FPGS高效表达质粒可以明显增强肿瘤细胞对MTX的敏感性，并具有一定的剂量-时间依赖性，mbr-FPGS高效表达组细胞IC50值（72h）为2.63ng/ml，约是对照组细胞IC50值（19.01ng/ml）的1/7(p<0.05)。

主权项

一种mbr‑FPGS高效表达载体，其特征在于：质粒载体为pEGFP‑C1，在pEGFP‑C1的CMV启动子上游含有279bp长的mbr序列，在pEGFP‑C1的HindⅢ和EcoRⅠ两个酶切位点之间含有FPGS的蛋白质编码区；其中，FPGS序列为说明书核苷酸和氨基酸序列表的序列1，mbr序列为说明书核苷酸和氨基酸序列表的序列2。