发明名称 通过定位改造的极耐热性漆酶基因及其超量表达的方法
摘要 嗜热栖热菌产生的极耐热性漆酶在纸浆漂白、纺织品脱色、生物质水解液脱毒等工业过程中有很大的应用潜力。但是极耐热性漆酶基因的表达水平很低,不能成为酶源。本发明首次运用pHsh系列的载体对漆酶基因进行克隆、原位诱变和诱导表达。通过对极耐热性漆酶基因特有的序列进行个例分析和多重探索性的定点诱变,本发明取得了减少基因中的稀有密码子、降低GC碱基含量、弱化核酸二级结构的形成等效果,使该基因在大肠杆菌中的表达水平比自然基因提高了317倍。
申请公布号 CN102061290B 申请公布日期 2013.01.09
申请号 CN201010567825.3 申请日期 2010.12.01
申请人 南京仙奕基因科技有限公司 发明人 张永昌;郑志强;邵蔚蓝;裴建军
分类号 C12N9/02(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12N9/02(2006.01)I
代理机构 南京知识律师事务所 32207 代理人 卢亚丽
主权项 一种经定位改造的极耐热性漆酶基因,其特征在于,它的序列如SEQ ID NO.5所示。2. 一种极耐热性漆酶基因的超量表达方法,是将权利要求1所述极耐热性漆酶基因克隆到表达载体pHsh中进行漆酶基因的诱导表达。
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