发明名称 一种检测乳品中多种抗生素残留的方法
摘要 本发明公开了一种检测乳品中多种抗生素残留的方法,通过对传感器表面进行特定修饰,采用分子标记物的抗体或特异性吸附蛋白进行配体固定;对乳品样品采取一系列预处理,对样品中的抗生素进行两次竞争抑制,将预处理后的样品通入传感器表面,使被分子标记的抗生素-抗体复合物和被分子标记的抗生素被吸附,通过测量分子标记的抗生素-抗体复合物间接测量样品中抗生素的含量;并对传感器表面进行重建,对其它抗生素预处理,进行另一种抗生素测量。本发明实现了同一传感器对多种抗生素的检测,大大节省了传感器的使用数量和传感器配体固定所需的时间,促进了基于表面等离子体共振的抗生素残留检测技术的推广和实际应用的发展。
申请公布号 CN101692080B 申请公布日期 2013.01.09
申请号 CN200910308194.0 申请日期 2009.10.12
申请人 天津大学 发明人 刘瑾;徐可欣;贾大超;张婉洁;苏洋
分类号 G01N33/04(2006.01)I 主分类号 G01N33/04(2006.01)I
代理机构 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 代理人 宋洁瑾
主权项 一种检测乳品中多种抗生素残留的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)对传感器表面进行修饰,采用分子标记物的抗体或特异性吸附蛋白进行配体固定;(2)对乳品样品采取预处理,对样品中的待测抗生素进行两次竞争抑制,包括:首先,向样品中加入适量的待测抗生素的单克隆或多克隆抗体进行一段时间的孵化,使得样品中的抗生素与其抗体充分反应,其中抗体为过量;其次,继续向样品中加入适量的被分子探针标记的待测抗生素,进行一段时间孵化,样品中剩余的抗体又与新加入的被分子探针标记的待测抗生素反应,其中分子探针标记的待测抗生素相对上步中加入的抗体量为过量;(3)测量环节:将预处理后的样品通入传感器表面,使被分子探针标记的待测抗生素‑抗体复合物和被分子标记的抗生素被吸附,通过测量分子标记的抗生素‑抗体复合物间接测量样品中待测抗生素的含量;所述测量环节包括如下步骤:a)通入磷酸盐或者盐酸盐或者硼酸盐缓冲液作为测量基准;b)用缓冲液配置不同所测抗生素浓度的溶液;c)按照步骤(2)所述方法,对配置的溶液进行预处理;d)将预处理后的溶液通入传感器一段时间,再通入缓冲液冲洗,记录通入溶液前后的传感器响应差值;e)对传感器的表面进行重建,并通入缓冲液冲洗;f)依次通入其他浓度的溶液,均记录传感器响应值;g)将各个浓度下的传感器响应绘制工作曲线,并进行二次多项式曲线拟合,获得回归曲线的方程;h)对于未知抗生素浓度的奶制样品进行测量,同样按照步骤d)、e)进行,获得样品通入前后的传感器差值;i)将传感器响应值代入回归曲线方程,预测出样品的抗生素浓度值;(4)对传感器表面进行重建,对其它抗生素预处理,进行另一种抗生素测量。
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