一种水杨苷对照品的制备工艺

摘要

本发明公开一种水杨苷对照品的制备工艺，包括如下步骤：（1）杨树花中水杨苷提取；（2）大孔树脂初步分离水杨苷；（3）正丁醇萃取；（4）正相硅胶法分离纯化水杨苷；（5）水杨苷的重结晶。与现有技术相比，本发明提供的水杨苷对照品的制备工艺，能够很好地符合中药标准品的要求。

主权项

一种水杨苷对照品的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：（1）杨树花中水杨苷提取：取杨树花4kg，剪碎，加15倍量水煎煮提取两次，每次1.2‑1.8h，合并两液，过滤，滤液静置过夜，取上层澄清提取液A，备用；（2）大孔树脂初步分离水杨苷，包括以下步骤（21）和步骤（22）：（21）大孔树脂的预处理：取大孔树脂D‑1015kg，加丙酮8000‑10000ml搅拌，浸泡10‑14小时，装入层析柱，排尽丙酮，蒸馏水冲洗至无丙酮味，加92%‑98%乙醇冲洗后，加蒸馏水28‑32L浸泡，用4%‑6%盐酸4‑6L冲洗树脂后，加蒸馏水冲洗至pH至6‑7，用4%‑6%NaOH4‑6L冲洗树脂，后用蒸馏水冲洗至pH至6‑7，加92%‑98%乙醇浸泡过夜，放出乙醇，用蒸馏水冲洗至无醇味，备用；（22）吸附和解吸附：将步骤（1）中提取液A加入大孔吸附树脂中上样吸附24h以上，吸附速率为10‑16L/h，用水洗至流出液变为浅黄色后，用15%‑25%乙醇洗树脂至TLC检测无水杨苷，收集15%‑25%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，得浓缩液B，保存备用；（3）正丁醇萃取：取浓缩液B，加正丁醇萃取3次，每次6‑10L，合并萃取液，减压回收正丁醇，回收完毕后样品中加少量甲醇，继续回收溶剂，得水杨苷样品粗品C；（4）正相硅胶法分离纯化水杨苷：取200目‑300目的硅胶1.2‑1.8kg，加2‑4L氯仿‑甲醇=8：1溶液混合均匀，装柱；取样品粗品C，加甲醇溶解，加 硅胶150‑250g拌样，旋转蒸发回收溶剂后，上样，依次采用氯仿‑甲醇比例依次为7：1、4：1、3：1的溶液及纯甲醇梯度洗脱，分段收集各流份；洗脱产品分别以TLC检测，合并含水杨苷且杂质干扰小的洗脱液，回收适量溶剂，待析出晶体后，用少量甲醇润洗，过滤，得水杨苷粗品D，备用；（5）水杨苷的重结晶：取水杨苷粗品D，加适量甲醇热溶，室温冷却结晶，待析出晶体后，过滤，收集结晶，如此重复操作至滤液无色，收集结晶，至真空干燥箱中干燥，得水杨苷标准品。