重组质粒pAdTrack-shRNA的测序方法

摘要

本发明提供了一种重组质粒pAdTrack-shRNA的测序方法，该方法包括：在多克隆位点前后设计上游引物M和下游引物N，使上游引物M和下游引物N分别在DNA链上有2个匹配位点，且引物M的2个匹配位点位于多克隆序列的同侧，引物N的2个匹配位点分别位于多克隆序列的两侧；进行第一次PCR反应，电泳后胶回收含有多克隆位点的目的条带；以胶回收产物为模板，利用上游引物M和下游引物N进行第二次PCR反应，对反应产物进行测序。利用本发明的方法，通过设计引物，进行二次PCR反应，可实现对以pAdTrack为基础的重组质粒的测序，为腺病毒AdEasy-1系统在基因治疗的领域应用奠定了基础。

主权项

重组质粒pAdTrack‑shRNA的测序方法，该方法包括：在多克隆位点前后设计上游引物M和下游引物N，使上游引物M和下游引物N分别在DNA链上有2个匹配位点，且引物M的2个匹配位点位于多克隆序列的同侧，引物N的2个匹配位点分别位于多克隆序列的两侧；进行第一次PCR反应，电泳后胶回收含有多克隆位点的目的条带；以胶回收产物为模板，利用上游引物M和下游引物N进行二次PCR反应，对反应产物进行测序。