检测细胞DACH1基因启动子区DNA甲基化状态的引物对及试剂盒

摘要

本发明提供用于检测细胞DACH1基因启动子区甲基化状态的引物对及试剂盒。本试剂盒首次选用细胞DACH1基因作为目标基因，该基因是本发明人通过MSP技术证明在胃癌、结直肠癌、肝癌和食管癌细胞中启动子区呈高甲基化状态的基因，具有首创性。利用本发明所述引物对及试剂盒检测胃癌、结直肠癌、肝癌及食管癌细胞的特异性好，在胃癌中为66％，结直肠癌50.4％，肝癌49％，食管癌70％；灵敏度高，达到0.5％，即1000个细胞中有5个癌细胞就能够被检测出。应用本发明试剂盒来检测细胞DACH1基因启动子区高甲基化状态可作为消化系统肿瘤诊断、疗效观察、预后判断、残留病灶检测等的有力手段，而且，操作简便、稳定性好，具有深远的临床意义和推广性。

主权项

一种用于检测细胞DACH1基因启动子区甲基化状态的引物对，包括甲基化引物和非甲基化引物，其中，所述甲基化引物的上游引物核苷酸序列为：5′‑GGAAAAAATTATTAGTTTTCGCGGAC‑3′，下游引物核苷酸序列为：5′‑AAACCGAAAACACAAAAATAACGATCG‑3′；所述非甲基化引物的上游引物核苷酸序列为：5′‑TTTGGAAAAAATTATTAGTTTTTGTGGAT‑3′，下游引物核苷酸序列为：5′‑AAAAAACCAAAAACACAAAAATAACAATCA‑3′。