流加底料发酵罐生产纳他霉素的方法

摘要

流加底料发酵罐生产纳他霉素的方法，涉及一种微生物发酵生产纳他霉素的工艺，提供一种流加底料发酵罐生产纳他霉素的方法。将纳他霉素生产菌株褐黄孢链霉菌活化后转接至种子培养基培养后再转接至一级、二级种子罐中培养，然后接入发酵罐的发酵培养基中，并在发酵培养24～48h、60～80h、90～100h时，通过恒速流加初始培养液质量体积的5％～20％发酵培养基，培养，待发酵液呈米黄色稍深，菌丝衰老，趋于自溶，染色浅时放罐，此时发酵液中纳他霉素含量达到9.5～11.5g/L。采用底料流加方法，发酵生产纳他霉素，纳他霉素产量比传统方法提高一倍以上，具有操作简单、成本低、设备要求低，效果佳等优势。

主权项

流加底料发酵罐生产纳他霉素的方法，其特征在于包括以下步骤：1)摇瓶种子培养无菌条件下，取褐黄孢链霉菌孢子涂布于高氏1号琼脂培养基斜面中，置于培养箱中培养，然后将培养好的孢子块接入盛有摇瓶种子培养基的三角瓶中，摇床培养；所述摇瓶种子培养基为可溶性淀粉20.0g/L，葡萄糖8.0～15.0g/L，黄豆饼粉10.0～20.0g/L，酵母粉8.0～20g/L，蛋白胨5.0～10.0g/L，碳酸钙2.0～10.0g/L，pH 7.0；2)一级种子罐培养将步骤1)所得的种子液按5％～10％的接种量接入盛有一级种子罐培养基的种子罐中培养；所述一级种子罐培养基为可溶性淀粉50.0～100g/L，葡萄糖5.0～25.0g/L，黄豆饼粉5.0～15.0g/L，蛋白胨5.0～10.0g/L，酵母粉5.0～10.0g/L，氯化钠2.0～5.0g/L，碳酸钙5.0～15.0g/L，消泡剂1～2g/L，pH 7.0±0.5；3)二级种子罐培养将步骤2)所得的种子液按10％～30％的接种量接入盛有二级种子罐培养基的种子罐中培养；所述二级种子罐培养基为可溶性淀粉50.0～100g/L，葡萄糖5.0～25.0g/L，黄豆饼粉5.0～15.0g/L，蛋白胨5.0～10.0g/L，酵母粉5.0～10.0g/L，氯化钠2.0～5.0g/L，碳酸钙5.0～15.0g/L，消泡剂1～2g/L，pH 7.0±0.5；4)底料流加发酵罐培养将步骤3)所得的种子液按5％～10％的接种量接入盛有发酵培养基发酵罐中，培养温度28～30℃，转速为100～200rpm，发酵时间120～160h，分别在发酵培养24～48h、60～80h、90～100h时，恒速流加初始培养液质量体积的5％～20％发酵培养基，待发酵液呈米黄色稍深，菌丝衰老，趋于自溶，染色浅时放罐，得纳他霉素；所述发酵培养基为可溶性淀粉50.0～100g/L，葡萄糖5.0～25.0g/L，黄豆饼粉5.0～15.0g/L，蛋白胨5.0～10.0g/L，氯化钠2.0～5.0g/L，碳酸钙5.0～15.0g/L，消泡剂0.5～2g/L，pH 7.0±0.5。