评判α-干扰素治疗慢性乙肝疗效的基因位点及应用

摘要

评判α-干扰素治疗慢性乙肝疗效的基因位点及其应用，该基因由以下方法制得：基因组DNA提取样本处理；引物设计与合成；设计PCR引物：正义引物如SEQIDNO.1所示，反义引物如SEQIDNO.1所示；PCR反应； 扩增产物的分析：PCR产物经1.5％琼脂糖电泳，观察结果，扩增产物长246bp。本方案已经找到相关的基因位点用来预先评判干扰素治疗乙肝的疗效，这样只要预先对想要采用干扰素治疗慢性乙肝的患者进行采血检测，就可以判断治疗方案的可行性，减少因盲目进行干扰素治疗中出现的经济和时间损失，未来我们将会制作出相关的试剂盒，这样就可以快速、有效的给出检测结果，费用上也可减少，市场前景可观。

主权项

评判α‑干扰素治疗慢性乙肝疗效的基因位点，其特征在于该基因由以下方法制得：基因组DNA提取样本处理：抽取静脉全血5mL，由实验室提取纯化DNA；引物设计与合成：以NCBI上序列为模板，运用Primer premier5.0引物设计软件 ；设计PCR引物：正义引物如SEQ ID NO.1所示，反义引物如SEQ ID NO.1所示；PCR反应条件：50μL反应体积中，含10倍反应缓冲液5μL， 氯化镁溶液(25mmol/L) 4.5μL，4种三磷酸脱氧核糖核酸(dNTP) (200mmol/L)4μL，两种引物各10pmol，Taq DNA多聚酶（5 U/mL）0.5μL，加入纯化好的DNA模板10μL，加水至50μL，混匀上机，94℃预变性3 min，94℃变性30 sec，54℃ 退火30sec， 72℃延伸30 sec；35个循环，最后72℃延伸10 min； 扩增产物的分析：PCR产物经1.5％琼脂糖电泳，观察结果，扩增产物长246 bp。