用于抑制内源性免疫球蛋白基因和生产转基因人独特型抗体的组合物和方法

摘要

本发明涉及缺乏内源性Ig并能够产生转基因抗体的转基因动物，及其制备方法。本发明还涉及在这样的动物中生产转基因抗体的方法，和由此生产的转基因抗体。

主权项

生产单克隆抗体的方法，包括（i）用免疫原免疫非人转基因动物，所述转基因动物具有至少一个种系失活的内源性Ig基因座和人工Ig基因座，（ii）从所述转基因动物分离产生单克隆抗体的细胞，其中所述产生单克隆抗体的细胞产生特异性结合所述免疫原的单克隆抗体；和（iii）使用所述产生单克隆抗体的细胞来产生特异性结合所述免疫原的所述单克隆抗体，或使用所述产生单克隆抗体的细胞来生产产生所述单克隆抗体的杂交瘤细胞，和使用所述杂交瘤细胞来产生所述单克隆抗体；其中所述非人转基因动物是通过从具有至少一个失活的内源性Ig基因座和人工Ig基因座的非人生殖细胞或其生殖细胞后代产生转基因动物而产生的；并且其中所述具有至少一个失活的内源性Ig基因座的非人生殖细胞是通过包括下列步骤的方法产生的：在生殖细胞、受精的卵母细胞或胚胎中表达至少一种大范围核酸酶，以产生具有至少一个失活的内源性Ig基因座的活的生殖细胞，其中所述大范围核酸酶识别存在于或接近于所述内源性Ig基因座的大范围核酸酶靶序列。