一种简单快速的肉鸭粪样总DNA提取方法

摘要

本发明属于动物医学领域，特别涉及动物粪便中DNA的提取方法，具体为：将肉鸭粪样用缓冲液浸泡并震荡均匀，去除杂质，收集沉淀物I，加入缓冲液，离心并去除上清液，离心处理至上清液无异色，得沉淀物II；在沉淀物II中加入蒸馏水，重悬并离心，取上清液II，加入蛋白酶K和EDTA混合液振荡混匀水浴；离心，弃上清液，得沉淀III；在沉淀III中加裂解液和EDTA的混合液，并在低温下使DNA复性；离心取上清液III，所述上清液III中含有总DNA；本发明所得的DNA片段较完整、大小约为500bp，浓度、纯度、得率高，所得DNA可直接作为PCR扩增的模板，以及粪便微生态学等方面的研究。本发明简单方便，产量、得率和浓度及纯度高且价格便宜。

主权项

一种简单快速的肉鸭粪样总DNA提取方法，其特征在于，具体包括以下步骤：A预处理将肉鸭粪样用缓冲液浸泡不少于5分钟后，充分震荡均匀，得肉鸭粪样混悬液，将肉鸭粪便混悬液通过离心处理，去除杂质并收集沉淀物I；B洗涤在步骤A所得沉淀物I中加入缓冲液，离心并去除上清液，重复离心处理至上清液无异色，得沉淀物II；C提取在沉淀物II中加入蒸馏水，重悬并离心，取上清液II，加入蛋白酶K和EDTA溶液的混合液振荡混匀，45‑60℃水浴9‑60分钟；初次离心，弃上清液，得沉淀III；在沉淀III中加裂解液和EDTA的混合液，并在低温下使DNA复性；再次离心，取上清液III，所述上清液III中含有总DNA。