发明名称 РЕКОМБИНАНТНЫЙ ПОЛИПЕПТИД А2, СЕЛЕКТИВНО СВЯЗЫВАЮЩИЙ ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ СЫВОРОТОЧНЫЙ АЛЬБУМИН (HSA) И ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В ДИАГНОСТИКЕ МИКРОАЛЬБУМИНУРИИ. РЕКОМБИНАНТНАЯ ДНК ра2, КОДИРУЮЩАЯ ПОЛИПЕПТИД А2. РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pQE-32-ра2, ОБЕСПЕЧИВАЮЩАЯ ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛИПЕПТИДА А2. ШТАММ E.coli М15-А2, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЙ РЕКОМБИНАНТНЫЙ ПОЛИПЕПТИД А2. СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ HSA. ПРИМЕНЕНИЕ ПОЛИПЕПТИДА А2 В КАЧЕСТВЕ РЕАГЕНТА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ HSA.
摘要 1. Рекомбинантный полипептид А2, характеризующийся аминокислотной последовательностью из 333 аминокислот, представленной на фиг.4 и ковалентно связанной с 13 аминокислотными остатками, кодируемыми pQE 32, обладающий способностью селективно связывать человеческий сывороточный альбумин - HSA.2. Рекомбинантная ДНК ра2, нуклеотидная последовательность которой представлена на фиг.3, кодирующая рекомбинантный полипептид А2 по п.1 и являющаяся HSA-связывающим фрагментом хромосомной ДНК штамма DG 13 стрептококков группы G - CГG.3. Рекомбинантная плазмидная ДНК pQE 32-ра2, представляющая собой плазмидную ДНК pQE 32, несущую рекомбинантную ДНК по п.2.4. Штамм Е. coli M 15, трансформированный рекомбинантной плазмидной ДНК pQE 32-ра2 по п.3 и экспрессирующий полипептид А2 по п.1.5. Рецепторноферментный способ определения в моче HSA в концентрации 20-200 мкг/мл, включающий построение калибровочной кривой с проявкой тетраметилбензидином - ТМБ, иммобилизацию полипептида А2 по п.1 на твердую фазу планшета, инкубирование, затем нанесение на него анализируемых проб мочи одновременно с меченным пероксидазой хрена HSA в разведении 1: 8000, проявка ТМБ, измерение оптической плотности и по значениям калибровочной кривой установление количества HSA в пробах мочи, причем для определения в моче HSA при концентрации более 100 мкг/мл пробы разводят раствором фосфатно-солевого буфера.6. Рецепторноферментный способ определения HSA в моче по п.5, отличающийся тем, что твердой фазой является поверхность полистиролового планшета.7. Рецепторноферментный способ определения HSA в моче по п.5, отличающийся тем, что твердой фазой является нитроцеллюлозная мембрана.8. Способ качественного и к
申请公布号 RU2011125752(A) 申请公布日期 2012.12.27
申请号 RU20110125752 申请日期 2011.06.22
申请人 Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) 发明人 Гупалова Татьяна Виталиевна;Бормотова Елена Алексеевна;Тотолян Артем Акопович
分类号 C12N15/00 主分类号 C12N15/00
代理机构 代理人
主权项
地址