一种原始间充质干细胞的制备方法

摘要

本发明公开了一种原始间充质干细胞的制备方法，它是采用人新鲜脐带，提取华通胶，经胶原酶消化后分离培养而成，适于冷冻保存。本发明还涉及按上述方法制备的原始间充质干细胞，按照国际细胞疗法协会制订的标准进行生物学表型鉴定确认为间充质干细胞。其增殖能力、纯度均高于骨髓间充质干细胞；释放的生长因子、细胞因子量明显高于骨髓间充质干细胞。

主权项

一种原始间充质干细胞的制备方法，其特征在于，其工艺方法为：取人新鲜脐带，以等渗的平衡盐溶液或无血清培养基溶液洗去脐带残留血液，去除脐动脉、脐静脉及脐带外膜，提取华通胶并剪切成块，再以等渗的平衡盐溶液或无血清培养基溶液冲洗后，浸泡于0.05～0.3％胶原酶溶液中，置35～37.5℃温箱中10～30小时，组织块消化，液体呈粘稠状，然后加入相当于原液1～10倍量的含胎牛血清培养基终止消化，分装于培养瓶或培养皿，置CO2培养箱，待细胞贴壁后更换含胎牛血清的培养基溶液，以后每隔2～4天换液一次，细胞贴壁融合后传代培养；传代培养2～4代，即时使用或冷冻保存备用。