一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法

摘要

本发明公开了一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，本发明的技术方案是：首先将大豆分离蛋白与TE缓冲液充分混合制成TE混合液，然后加入混合液二倍体积的异硫氰酸胍裂解液，充分混匀，室温裂解。加入等体积的酚、氯仿/异戊醇抽提蛋白，离心后上清液中加入等体积的氯仿/异戊醇抽提蛋白，离心后上清液加入等体积的氯仿再抽提蛋白，离心，上清液用异丙醇沉淀，离心，沉淀用乙醇洗涤，室温晾干，溶于TE缓冲液中即可基因组DNA的TE溶液。本发明从大豆分离蛋白中提取到高质量的适宜于PCR检测的基因组DNA，其浓度为1558μg/ml，OD260/OD280的值为1.666。本发明操作简单、耗时短、利于快速检测。

主权项

一种大豆分离蛋白基因组DNA的提取方法，其特征在于，首先将大豆分离蛋白与TE缓冲液充分混合制成TE混合液，所述的TE混合液中大豆分离蛋白为30～80mg，TE缓冲液为120～320µL，然后加入混合液二倍体积的异硫氰酸胍裂解液，充分混匀，室温裂解，加入等体积的酚、氯仿/异戊醇抽提蛋白，所述的酚、氯仿/异戊醇的比例为25:24:1，离心后上清液中加入等体积的氯仿/异戊醇抽提蛋白，所述的氯仿/异戊醇的比例为24:1，离心后上清液加入等体积的氯仿再抽提蛋白，离心，上清液用异丙醇沉淀，离心，沉淀用乙醇洗涤，室温晾干，溶于TE缓冲液中即可基因组DNA的TE溶液。