食品及饮料中芒果源性成分快速筛查试剂盒及检测方法

摘要

本发明属于食品及饮料中芒果源性成分的快速筛查试剂盒与检测技术，具体是使用实时荧光PCR技术检测芒果的ITS2基因基因片段。本发明针对芒果源性成分采用实时荧光PCR技术，快速、灵敏、特异地检测内含基因，从而筛选食品及饮料中是否含芒果源性成分。该快速筛查试剂盒及检测技术用于检测混合样品中可能含有过敏原芒果成分，也可以用于检测样品中是否不含有芒果成分。该方法快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。

主权项

快速检测芒果源性成分的试剂盒包括P C R扩增反应液、阳性对照D N A两种特征性部分：P C R扩增反应液总体积为25μL，其中含：样品DNA(10μg/mL‑100μg/mL)2μL，芒果引物对(10μmol/L)1μL，芒果探针(10μmol/L)1μL，Taq DNA聚合酶(5U/μL)0.5μl，dNTP(10μmol/L)2μL，10×PCR缓冲液2.5μL，水补足至总体积25μL。也可采用商品化的实时荧光PCR扩增体系，反应预混液Real time Mix 10μL、10μmol/L上游引物0.5μL、10μmol/L下游引物0.5μL、10μmol/L探针1μL和模板成分2μl，加ddH2O(灭菌双蒸水)补足至25μl。本发明涉及的实时荧光PCR扩增检测用的引物和探针，其序列如下：(1)上游引物：5’‑TCTGAGTTCTCGGTGACGCTTTC‑3’；(2)下游引物：5’‑CCGGTCTCTAGGGTCGAAGAGC‑3’；(3)探针序列：5’‑FAM‑ATCCTGTCGTGCGGTTGCGTTCTCC‑TAMRA‑3’。在实际应用中，上游引物、下游引物和探针的体积比为：1∶1∶2。阳性对照DNA为含有芒果源性成分的DNA提取液。