利用大肠杆菌表达系统制备重组人神经生长因子的方法

摘要

本发明公开了一种利用大肠杆菌表达系统制备重组人神经生长因子的方法。该重组人神经生长因子β亚基基因含有6组氨酸纯化位点、肠激酶切割位点以及经过修饰的人神经生长因子β亚基成熟肽段基因及分子伴侣基因。该重组人神经生长因子β亚基基因在大肠杆菌中表达量高；所产生的包涵体蛋白在分子伴侣的辅助下高效复性；用肠激酶准确切割分子伴侣后，经镍柱亲和层析获得的重组人神经生长因子纯度大于99%，生物学活性大于500000AU/mg。

主权项

一种重组人神经生长因子β亚基基因，其含有6组氨酸纯化位点、肠激酶切割位点以及经过修饰的人神经生长因子β亚基成熟肽段基因和分子伴侣基因，其中所述人神经生长因子β亚基成熟肽段基因为经过原核生物高频密码子改造后的基因，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示；所述分子伴侣基因为经过修饰的人神经生长因子β亚基前导肽基因，其碱基序列如SEQ ID NO：2所示。