双抗大麦黄矮病毒和小麦矮缩病毒的RNA干涉载体、构建方法及在小麦遗传转化中的应用

摘要

本发明涉及“双抗大麦黄矮病毒和小麦矮缩病毒的RNA干涉载体、构建方法及在小麦遗传转化中的应用”，属于基因工程技术领域。该表达载体采用的骨架载体是pMCG161，在其上游的两个酶切位点AscI、AvrII间插入BW-CP基因的正义链，在下游的两个酶切位点SpeI、SgfI间插入BW-CP基因的反义链，通过载体上的intron形成发夹结构，适合基因枪转化单子叶植物，可获得抗BYDV-GAV和WDV的转基因后代。通过基因枪法将其转入小麦中，获得对大麦黄矮病毒GVA和小麦矮缩病毒具有双重抗性的转基因小麦品种。本发明为植物抗病育种提供了一种高效的育种途径和新的策略。

主权项

双抗大麦黄矮病毒和小麦矮缩病毒的RNA干涉载体，包括骨架载体和含有正、反义链的发夹结构，其特征在于：以SEQ ID NO13所示的BW‑CP基因序列作为正、反义链，所述骨架载体为pMCG161，所述BW‑CP基因的正义链插入pMCG161中上游的两个酶切位点AscI、AvrII间，BW‑CP基因的反义链插入pMCG161中下游的两个酶切位点SpeI、SgfI间。