构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体

摘要

本发明公开了一种构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体。本发明提供的载体，按照如下方法制备：1)将轻链区域SacB的编码基因插入到pDF的多克隆位点间，得到中间载体PSBX；2)将步骤1)得到的中间载体PSBX的BssHII酶切位点突变为BglII酶切位点，得到中间载体PSGX；3)将重链区域SacB的编码基因插入到步骤2)得到的中间载体PSGX的Nhe I和Nco I酶切位点间，得到载体pDF-D-SacB。本发明的实验证明，所获得的含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB适用于构建大容量噬菌体抗体库。

主权项

一种载体，按照如下方法制备：1)将SacB的编码基因1插入到pDF的多克隆位点间，得到中间载体PSBX；2)将步骤1)得到的中间载体PSBX的BssHII酶切位点改为BglII酶切位点，得到中间载体PSGX；3)将SacB的编码基因2插入到步骤2)得到的中间载体PSGX的Nhe I和Nco I酶切位点间，得到载体pDF‑D‑SacB；所述SacB的编码基因1为序列表的序列1自5’末端第30‑1908位核苷酸；所述SacB的编码基因2为序列表中的序列2自5’末端第7‑1857位核苷酸。