一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法，属于菊花蛋白质组学领域。该方法包括：以栽培菊花作母本，野菊为父本进行菊花远缘杂交工作。授粉后1h及24h，剪下已授粉的花序；去除取得的花序中舌状花花瓣及萼片得到雌蕊。所得的雌蕊用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质样品；运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白，并进行生物信息学分析。本发明针对菊花及其近缘属野生种，提供了一种快速准确鉴定菊花花粉与柱头互作过程中的关键差异蛋白，为解决菊花远缘杂交不亲和性提供研究基础。

主权项

一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤： （1）以栽培菊花作母本，野菊为父本进行菊花远缘杂交工作，于授粉后1h及24h，分别剪下已授粉的花序；（2）去除所述花序中的舌状花花瓣及萼片得到授粉后1h的雌蕊和授粉后24h的雌蕊，将所述的的雌蕊分别用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质，得到授粉后1h雌蕊的蛋白质样品（I）和授粉后24h雌蕊的蛋白质样品（II）；（3）将授粉后1h雌蕊的蛋白质样品（I）和授粉后24h雌蕊的蛋白质样品（II）分别运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白，并进行生物信息学分析鉴定出菊花花粉与柱头互作差异蛋白。