发明名称 |
一种高灵敏度焦测序反应液及其配制方法 |
摘要 |
本发明涉及一种高灵敏度焦测序反应液的配制方法,它通过增加焦测序反应液中的ATP硫酸化酶量来抑制其底物APS和荧光素酶的反应,使得在高浓度荧光素酶条件下,背景信号能够控制在很低的水平,而反应信号显著上升,因此使用与通常相比低一个数量级的几十fmol量的DNA就可进行碱基测序。因此,对于来源稀少的样本以及扩增效率低下的产物能够实现准确的短序列测定,同时,这一新型的高灵敏反应液还可应用于以价格低廉的光敏管阵列为检测器的便携式生物发光分析仪,从而实现快速、高效、低成本的DNA分析。 |
申请公布号 |
CN101724704B |
申请公布日期 |
2012.12.26 |
申请号 |
CN200910264066.0 |
申请日期 |
2009.12.29 |
申请人 |
华东医学生物技术研究所 |
发明人 |
周国华;武海萍;吴文娟 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/66(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
南京天华专利代理有限责任公司 32218 |
代理人 |
夏平;刘成群 |
主权项 |
一种焦测序反应液的配制方法,其特征在于通过提高传统的APS‑ATP硫酸化酶焦测序反应液中ATP硫酸化酶的浓度来降低焦测序反应的背景信号,从而提高焦测序反应的灵敏度;传统的APS‑ATP硫酸化酶焦测序反应液的组成:pH7.7的0.1mol/L Tris‑HAc,2mmol/L EDTA,10mmol/L Mg(Ac)2,0.1%BSA,1mmol/L DTT,5μmol/LAPS,0.4g/L PVP,0.4mmol/L D‑荧光素,1~2U/mL三磷酸腺苷双磷酸酶,10~100U/mL核酸聚合酶,2~10mg/L荧光素酶,0.2U/mLATP硫酸化酶。 |
地址 |
210002 江苏省南京市中山东路293号 |