一种对脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液进行纯化的方法

摘要

本发明提供的对脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液进行纯化的方法，包括对脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液的电导率和pH进行预调整、采用中空纤维超滤系统进行超滤、用洗滤液对中空纤维超滤系统进行洗滤和淋洗等步骤，将洗滤后的百日咳抗原溶液和淋洗得到的淋洗液合并即得到纯化的百日咳疫苗抗原溶液。本发明采用中空纤维超滤法对脱毒后的无细胞百日咳抗原溶液进行纯化，除去脱毒剂和在脱毒过程中产生的色素分子。对利用此法纯化得到的百日咳疫苗原液进行检测，其戊二醛、赖氨酸含量和原液外观均达到《药典(2010年版)》三部规定的标准。该方法具有工作效率高、回收率高、产品的效价高、适合工业化生产、可实现全封闭操作降低污染风险等特点。

主权项

一种对脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液进行纯化的方法，包括以下步骤：步骤一、预调整：在0‑18℃条件下进行以下操作：向脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液中添加氯化钠溶液，使脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液的电导率调整至40ms/cm，向脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液中添加磷酸盐，使脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液的pH调整至6.5‑7.5，其中，所述抗原溶液中的氯化钠溶液的浓度调整为0.15‑1摩尔每升，所述的磷酸盐为磷酸二氢钠或磷酸氢二钠；步骤二、超滤浓缩：采用中空纤维超滤系统对经步骤一处理的脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液进行超滤浓缩，使百日咳抗原溶液中的蛋白氮含量为每毫升200‑700微克时，进行步骤三的操作；所述的采用中空纤维超滤系统对经步骤一处理的脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液进行超滤浓缩的具体方法是：将经步骤一处理的脱毒后的百日咳疫苗抗原溶液注入中空纤维超滤系统的储罐（1）中，并将中空纤维超滤系统储罐（1）中的百日咳疫苗抗原溶液的温度控制在0‑18℃；所述的中空纤维超滤系统的中空纤维膜柱（5）的截留分子量为10KDa；启动隔膜泵（2），调节带有流速监测装置的滤出阀（4）和隔膜泵（2）使滤出阀（4）所带流速监测装置显示的切向流速在15‑40LMH范围内，至超滤浓缩后的百日咳抗原溶液中的蛋白氮含量为每毫升200‑700微克时，进行步骤三的操作；步骤三、洗滤：向中空纤维超滤系统的储罐（1）中添加洗滤液进行洗滤，调节滤出阀（4）和隔膜泵（2）的速度来控制滤出液的流速，使滤出液的流速与洗滤液的添加速度一致，在洗滤过程中不定时取样检测洗滤后的百日咳抗原溶液中的脱毒剂的含量和洗滤后的百日咳抗原溶液的颜色，脱毒剂的含量和洗滤后的百日咳抗原溶液的颜色符合《中国药典(2010年版)》规定的“稀释成成品后游离甲醛含量应不高于0.2g/L，戊二醛含量应小于0.01g/L、外观为淡棕色”的条件时，则停止洗滤；所述的洗滤液为pH值为6.5‑8.5、浓度为0.15‑1摩尔每升的氯化钠溶液，洗滤结束后，收集中空纤维系统中的溶液得到洗滤后的百日咳抗原溶液；步骤四、淋洗回收：用洗滤液对中空纤维超滤系统进行淋洗，将淋洗得到的淋洗液和经步骤三得到的洗滤后的百日咳抗原溶液合并得到纯化的百日咳疫苗抗原溶液，所述的洗滤液为pH值为6.5‑8.5、浓度为0.15‑1摩尔每升的氯化钠溶液；上述步骤二、步骤三和步骤四应在0.5‑3小时完成。