L-苏氨酸的分析方法和L-苏氨酸脱氢酶

摘要

本发明提供了包含在被分析物中的L-苏氨酸的分析方法，将含有被分析物的样品与来源于钩虫贪铜菌（Cupriavidus necator）的L-苏氨酸脱氢酶以及辅酶NAD+混合，经过预定的时间后，分析NADH的量或2-氨基-3-氧代丁酸的量；可用于该分析方法中的新型L-苏氨酸脱氢酶（TDH；EC 1.1.1.103）——来源于钩虫贪铜菌（Cupriavidus necator）的L-苏氨酸脱氢酶；用于制备该酶的基因等和酶的制备方法；还提供了包括（A）上述L-苏氨酸脱氢酶和（B）辅酶NAD+的用于分析L-苏氨酸脱氢酶的试剂盒，其是在缓冲液中含有上述L-苏氨酸脱氢酶且用于分析L-苏氨酸脱氢酶的酶制品；使用上述L-苏氨酸脱氢酶的酶传感器。

主权项

被分析物中包含的L‑苏氨酸的分析方法，其中，将含有被分析物的样品与来源于钩虫贪铜菌（Cupriavidus necator）的L‑苏氨酸脱氢酶或者具有下述（1）‑（3）中的任一氨基酸序列且具有L‑苏氨酸脱氢酶活性的蛋白质以及辅酶NAD+混合，经过预定的时间后，分析NADH的量或2‑氨基‑3‑氧代丁酸的量，（1）序列表的序列号1记载的氨基酸序列；（2）在序列表的序列号1记载的氨基酸序列中缺失、取代和/或添加1~30个氨基酸而得到的氨基酸序列；（3）相对于序列表的序列号1记载的氨基酸序列具有90%以上的同一性的氨基酸序列。