发明名称 |
高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法、相关CIK细胞及应用 |
摘要 |
本发明涉及一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法,包括以下步骤:(1)将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞,得到CIK前期细胞;(2)将CIK前期细胞置于含有100ng/ml PHA、100ng/ml IL-6、10ng/ml PGE2的细胞培养液中培养24小时;(3)转移至经1ug/ml CD3单抗包被的细胞培养瓶中,加入1000U/ml IFN-γ培养48小时;(4)加入1000U/ml IL-2以及100ng/ml IL-1α培养4天;(5)加入1ug/ml胰岛素继续培养7-14天。还提供了相关的CIK细胞及应用、抑制外周血单个核细胞向CD4+CD25+Treg细胞分化的方法及促进CIK细胞增殖的方法。本发明的CIK细胞制备方法设计巧妙,制备得到的肿瘤杀伤细胞-CIK细胞具有较强的增殖能力,较高的毒活性,具有更佳的肿瘤杀伤效率,提高临床疗效,适于大规模推广应用。 |
申请公布号 |
CN102827809A |
申请公布日期 |
2012.12.19 |
申请号 |
CN201210324368.4 |
申请日期 |
2012.09.04 |
申请人 |
上海易美生物技术有限公司 |
发明人 |
凌丹彦;戴书缙 |
分类号 |
C12N5/0783(2010.01)I;C12N5/0786(2010.01)I;A61K35/14(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P31/00(2006.01)I;A61P37/02(2006.01)I |
主分类号 |
C12N5/0783(2010.01)I |
代理机构 |
上海智信专利代理有限公司 31002 |
代理人 |
王洁;郑暄 |
主权项 |
一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞,得到CIK前期细胞;(2)将CIK前期细胞置于含有100ng/ml PHA、100ng/ml IL‑6、10ng/ml PGE2的细胞培养液中培养24小时;(3)转移至经1ug/ml CD3单抗包被的细胞培养瓶中,加入1000U/ml IFN‑γ培养48小时;(4)加入1000U/ml IL‑2以及100ng/ml IL‑1α培养4天;(5)加入1ug/ml胰岛素继续培养7‑14天。 |
地址 |
200032 上海市徐汇区斜土路1223号之俊大厦2402室 |