一种建立通用玉米再生体系的方法

摘要

本发明公开了一种建立通用玉米再生体系的方法。通过将不同玉米自交系幼胚接种到附加不同激素组合的诱导培养基上，将诱导的合适胚状体转接到分化培养基上高频分化再生苗，再将再生苗转入到生根培养基上进行生根诱导，得到再生植株；其中，诱导培养基配方采用：N6大量元素、B5微量元素、B5维生素、0.04mg/L核黄素，0.04mg/L叶酸、0.1mg/L烟酸、0.1mg/L D-泛酸钙、0.04mg/L对甲基苯甲酸、蔗糖50g/L、2.4-D为0.4mg/L和6-BA5mg/L。本发明对不同玉米自交系具有很好的通用性以及获得再生植株时间较短等特性，具有重要的应用价值。

主权项

一种建立通用玉米再生体系的方法，其特征在于，具体方法步骤如下：(1)表面消毒：选用不同玉米优良自交系种子，根据不同基因型玉米的生长发育特点，在授粉后8‑14d幼穗均可，表面75％酒精消毒后无菌条件下剥取不同大小的幼胚为实验材料；(2)将消毒后的幼胚接到诱导培养基，在28℃，培养2‑3周；诱导培养基配方采用：N 6大量元素、B5微量元素、B5维生素、0.04mg/L核黄素，0.04mg/L叶酸、0.1mg/L烟酸、0.1mg/L D‑泛酸钙、0.04mg/L对甲基苯甲酸、蔗糖50g/L、2，4‑D为0.4mg/L和6‑BA 5mg/L；(3)将胚性愈伤转接到分化培养基中，28℃16h光培养和8h暗培养，2周；分化培养基配方采用：N6大量元素、B5微量元素、B5维生素、0.04mg/L核黄素，0.04mg/L叶酸，0.1mg/L烟酸，0.1mg/L D‑泛酸钙，0.04mg/L对甲基苯甲酸，蔗糖50g/L、6‑BA2mg/L、KT 0.5mg/L；(4)将分化的幼苗接到生根培养基中，28℃16h光培养和8h暗培养，1周；生根培养基配方采用：1/2MS培养基、NAA0.5mg/L；(5)植株的移栽：将小植株从培养基中取出，用清水洗净培养基，移入培养土；移栽后浇透，移栽后的小苗要用塑料薄膜罩住；温度白天保持25℃适于茎叶生长，夜间维持在20℃，有利于根系的生长，1‑2周后，植株长出新叶，意味着移栽成活；幼苗长出两片新叶后，再移栽到田间或温室中；培养土按照蛭石∶泥炭体积比为1∶1。