弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用

摘要

本发明涉及弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用，主要解决对空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌分离方法存在的漏检率高、鉴定步骤繁复且成本较高、筛选效能不够直观的技术难题。本发明技术方案：弯曲菌分离、鉴定的试剂盒，包括：选择性增菌液Ⅰ、选择性增菌液Ⅱ、改良卡尔马里琼脂平板、哥伦比亚血平板、微需氧产气袋、革兰染色液、氧化酶试剂、马尿酸纸片和马尿酸酶反应试剂；利用选择性分离培养基对应生长的弯曲菌典型菌落形态、简易生化和特异性酶-底物反应组合试验鉴定空肠弯曲菌或非空肠弯曲菌。

主权项

弯曲菌分离、鉴定的试剂盒，包括：1）、选择性增菌液Ⅰ：基础成分：胰化酪蛋白胨20.0g，N,N‑二羟乙基甘氨酸缓冲液10.0g，氯化钠5.0g，酵母浸出物 2.5g，琼脂粉 1.0g，亚硫酸铁 0.25g，Na2S2O3 0.25g，丙酮酸钠 0.25g，蒸馏水983.75ml；碱性高铁血红素溶液 6.25ml；10ml抗生素组合液：氨曲南10mg/L，两性霉素B2mg/L，万古霉素10mg/L；上述组分混合后分装225ml/瓶备用；2）、选择性增菌液Ⅱ：选择性增菌液Ⅰ分装9ml/管，备用；3）、改良卡尔马里琼脂平板：成分：活性炭4.0g，哥伦比亚琼脂基础990.0ml，抗生素添加剂10ml：丙酮酸钠50.0mg，放线菌酮50.0mg，头孢哌酮16.0mg，氯化铁血红素16.0mg，万古霉素10.0mg，上述组分混合后倾注无菌平板置冰箱中，备用；4）、哥伦比亚血平板：哥伦比亚血琼脂基础950ml：蛋白胨23.0g，琼脂粉10.0g，氯化钠5.0g，淀粉1.0g，加蒸馏水950ml煮沸3次后加入50ml无菌脱纤维绵羊血，混匀后倾注无菌平板置冰箱中，备用；5）、微需氧产气袋：成分：碳酸氢钠8.0g，活性炭3.0g，枸橼酸2.0g，铁粉7g，无水硫酸铜1.5g，硅藻土10g，均匀干燥脱水后置锡纸袋内，真空封口；6）、革兰染色液：革兰染色液Ⅰ液：结晶紫酒精饱和液10ml和1%草酸铵水溶液90ml的混合液；革兰染色液Ⅱ液：碘酒；革兰染色液Ⅲ液：纯酒精液；革兰染色液Ⅳ液：即复红染液；7）、氧化酶试剂：成分：质量百分比浓度1%对‑氨基‑4‑甲基苯胺盐酸盐水溶液；8）、马尿酸纸片和马尿酸酶反应试剂：所述的马尿酸酶反应试剂为茚三酮溶液。