一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法

摘要

本发明公开了一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法，具体步骤如下：1）取猪小肠粘膜，冲洗；2）加入体积分数4-5%的乙酸冰水混合物，捣碎制匀浆；3）沸水浴10min，冷却至0-10℃；4）离心，上清液超声波裂解30s，搅拌浸提，离心，取上清液；5）沉淀物用体积分数4-5%的乙酸混合，搅拌浸提，离心，取上清液；6）合并上清液，离心，取上清液；7）将上清液上样于Sephadex G2100凝胶柱层析，收集洗脱液；8）采用琼脂糖弥散方法检测各收集管液体的抗菌性，收集有抑菌作用的洗脱液，得到猪小肠抗菌肽PR39，真空冷冻干燥保存。本发明工艺简单，成本低廉，去除了大多数的杂蛋白，提取率高。

主权项

一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：1）取猪小肠粘膜用灭菌生理盐水冲洗；2）按照20ml/g的比例加入体积分数4‑5%的乙酸冰水混合物，捣碎制匀浆；3）90‑100℃水浴10min，后迅速冷却至0‑10℃；4）离心，取上清液置冰上超声波裂解30s，4℃搅拌浸提，再离心，取上清液；5）将离心的沉淀物用等体积的体积分数4‑5%的乙酸混合，搅拌浸提，离心，取上清液；6）合并步骤4）和步骤5）得到的上清液，调节pH=5‑6.5，离心，取上清液；7）将上清液上样于Sephadex G2100凝胶柱层析，收集洗脱液；8）采用琼脂糖弥散方法检测各收集管液体的抗菌性，收集有抑菌作用的洗脱液，得到猪小肠抗菌肽PR39，真空冷冻干燥保存。