SORF构建体和多基因表达

摘要

本发明的实施方案涉及用于表达多肽的载体构建体和方法，所述多肽包括多聚的产物，诸如治疗性抗体。特定构建体允许从单个开放读码框(sORF)制备表达产物。一个实施方案提供了用于产生一种或多种重组蛋白产物的分离的或纯化的表达载体，所述表达载体包含单个开放读码框插入物；所述插入物包含：编码信号肽的信号肽核酸序列；编码第一多肽的第一核酸序列；编码第一蛋白切割位点的第一插入核酸序列，其中所述第一蛋白切割位点由火球菌属的lon蛋白酶基因的内含肽区段、或火球菌属或甲烷球菌属的klbA基因的内含肽区段、或源自它们的修饰的内含肽区段提供；和编码第二多肽的第二核酸序列。构建体和方法的某些实施方案采用：Pyrococcus abyssi、激烈火球菌或掘越氏火球菌OT3的lon蛋白酶基因的内含肽区段；或Pyrococcus abyssi、激烈火球菌或詹氏甲烷球菌的klbA基因的内含肽区段；或其它内含肽区段。

主权项

用于产生一种或多种重组蛋白产物的分离的或纯化的表达载体，所述表达载体包含单个开放读码框插入物；所述插入物包含：(a)编码信号肽的信号肽核酸序列；(b)编码第一多肽的第一核酸序列；(c)编码第一蛋白切割位点的第一插入核酸序列，其中所述第一蛋白切割位点由火球菌属的lon蛋白酶基因的内含肽区段、或火球菌属或甲烷球菌属的klbA基因的内含肽区段、或源自它们的修饰的内含肽区段提供；和(d)编码第二多肽的第二核酸序列；其中所述编码所述第一蛋白切割位点的第一插入核酸序列可操作地位于所述第一核酸序列和所述第二核酸序列之间；其中所述编码所述信号肽的信号肽核酸序列可操作地位于所述第一核酸序列之前；且其中所述表达载体能够表达单个开放读码框多肽，所述多肽可在所述第一蛋白切割位点处被切割。