包含白喉毒素无毒突变体CRM197或其片段的融合蛋白

摘要

本发明涉及分子病毒学和免疫学领域。具体而言，本发明涉及白喉毒素无毒突变体CRM197或其片段在融合蛋白中作为分子内佐剂增强与其融合的目的蛋白(例如HEV衣壳蛋白、流感病毒M2蛋白或其免疫原性片段)的免疫原性的用途。本发明还涉及增强目的蛋白(例如HEV衣壳蛋白、流感病毒M2蛋白或其免疫原性片段)的免疫原性的方法，其包括将CRM197或其片段与目的蛋白融合表达，形成融合蛋白。本发明还涉及包含CRM197或其片段以及目的蛋白(例如HEV衣壳蛋白、流感病毒M2蛋白或其免疫原性片段)的融合蛋白，其中CRM197或其片段增强了目的蛋白的免疫原性。本发明还涉及编码所述融合蛋白的分离的核酸，包含所述核酸的构建体和载体，以及包含所述核酸的宿主细胞。本发明还涉及所述融合蛋白的用途，其用于制备药物组合物或疫苗。

主权项

一种融合蛋白，其包含CRM197或其片段以及目的蛋白，并且其中CRM197或其片段增强了目的蛋白的免疫原性，其中，例如，CRM197的片段可以包含，CRM197的A片段，转膜结构域T，和/或受体结合位点结构域R；例如，CRM197片段可以包含A片段，或者A片段和转膜结构域T；例如，CRM197片段可以包含CRM197的aa 1‑190，例如包含CRM197的aa 1‑389；例如，目的蛋白可以是HEV衣壳蛋白或其免疫原性片段；例如，HEV衣壳蛋白的免疫原性片段可以包含或者是HEV‑239（HEV衣壳蛋白aa 368‑606），E2（HEV衣壳蛋白aa 394‑606）或E2s（HEV衣壳蛋白aa 455‑606）；例如，目的蛋白可以是流感病毒M2蛋白或其免疫原性片段；例如，M2蛋白的免疫原性片段可以包含或者是M2e（M2蛋白aa1‑24）；例如，在所述融合蛋白中，CRM197或其片段可连接至目的蛋白的N端和/或C端，任选地使用接头进行连接；例如，所述融合蛋白可以包含CRM197或其片段以及HEV衣壳蛋白或其免疫原性片段，二者任选地使用接头进行连接；例如，所述融合蛋白可以是具有SEQ ID NO：4，6，8，10，12，14，16或18所示氨基酸序列的蛋白；例如，所述融合蛋白可以包含CRM197或其片段以及流感病毒M2蛋白或其免疫原性片段，二者任选地使用接头进行连接；例如，所述融合蛋白可以是具有SEQ ID NO：34，36，38，40，42或44所示氨基酸序列的蛋白。