主权项 |
一种测定杏香兔耳风提取液中绿原酸含量的方法,其特征在于,步骤如下:步骤1、测定合格杏香兔耳风提取液中绿原酸含量,并采集近红外光谱;样品制备与收集取药材杏香兔耳风置多功能提取罐内,加入20倍量水,浸渍60分钟,煎煮1.5小时,过滤,药渣加水15倍量,煎煮1.5小时,过滤,合并滤液,提取过程中每3分钟用取样器取50ml提取液,采集近红外光谱,并进行绿原酸类成分含量测定,样品绿原酸类成分UV分析 取杏香兔耳风提取液1ml至10ml容量瓶,加甲醇稀释至刻度,作为供试品,另称取绿原酸对照品9.58mg至10ml容量瓶,用甲醇稀释至刻度,取1ml至10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,配成95.8ug/ml对照品溶液,再稀释成9.58ug/ml浓度溶液作为对照品溶液,照紫外测定法,于328nm处测定吸收度,以外标法对供试品绿原酸类成分进行含量测定,获取NIR光谱扫描光谱时在样品溶液中浸入NIR光谱仪自带的光纤透射式探头,光纤长2m ,待溶液稳定并无气泡后进行扫描,测试条件为:扫描次数300 次,分辨率2nm ,扫描光谱范围为1100~2300 nm,共得到61个样品的总光谱图, 步骤2、采用化学计量学软件分别建立杏香兔耳风提取液近红外光谱与绿原酸含量之间的对应模型;光谱预处理 对扫描得到的原始吸收光谱进行光谱预处理,以消除噪音和基线漂移的影响,采用的预处理方法为一阶导数9点平滑法savitzky‑golay,一阶导数光谱图,经一阶导数处理可以消除样品由于颜色差别引起的光谱基线偏移和漂移,建立PLS1数学模型 样品顺序编号,随机选择8个作为外部验正集样品,其余作为建模样品,将经过预处理后的光谱数据与UV分析数据进行关联,采用偏最小二乘法PLS1 ,交叉‑验证法cross‑validation ,用Unscrambler定量分析软件建立模型,NIR和UV测定的异常值分别采用光谱影响值Leverage和化学值误差Residual这2个统计量来检验剔除,经过异常值的剔除进行优化,得到较为理想的校正模型,得到的样品绿原酸类成分的NIR光谱预测值与样品绿原酸类成分实测值之间相关性良好,测定数据偏差较小,样品绿原酸类成分模型的主成分维数为6,R2=0.9411, RMSECV= 86.33807,步骤3、测定待测的绿原酸含量样品的近红外光谱;步骤4、利用对应模型,通过化学计量学软件分别获得待测的绿原酸含量样品中绿原酸含量的含量。 |